各位申请人：
科研处从全国成功申报国家自然科学基金项目中挑选了一份严格按照报告正文撰写提纲要求撰写，并在撰写的整体布局、写作方法上比较适宜的申请书作为样板申请书，提供给其他申请人在撰写申请书时参考。
注：考虑到本项目也将申请国家自然科学基金，从技术保密方面考虑，涉及核心技术和关键问题之处将以“XXXXXXX”代替。
报告正文
（一）立项依据与研究内容
1立项依据
肝纤维化是严重威胁人类健康的重要疾病之一，迄今没有满意的治疗方法。目前国内外绝大多数学者认为，肝星状细胞（hepatic stellate cell，HSC）激活是肝纤维化的关键，抑制HSC的激活对肝纤维化的防治有重要价值[1]。
粉防己碱（tetrandrine，又名汉防己甲素）是中药粉防己（Stephania tetrandra S Moore）的主要有效生物碱成分，具有广泛的药理作用。抗肝纤维化是Tet的重要应用领域之一。我们研究室在过去的十几年中，对Tet抗肝纤维化作用及机制进行了系统研究，证实Tet是抗肝纤维化有效药物。然而，由于Tet的剂量安全范围较小，以往研究发现的抗肝纤维化有效剂量与中毒剂量比较接近，故成为限制其临床应用的重要因素。近年国内Tet抗肝纤维化研究也由此逐渐走向低谷。为减少毒副反应，拓展该药物的临床应用，我们近四年从降低Tet的单药剂量、联合用药及改造药物毒性基团等方面进行实验性探索。新近，我们在国内外首次发现，低浓度Tet能上调转化生长因子β（transforming growth factor factor β，TGF-β）抑制性信号分子Smad 7表达，调控TGF-β-Smad信号通路，抑制体外培养静止期HSC活化，阻断TGF-β1促静止期HSC活化效应，Tet还诱导活化HSC活化逆转。部分最新研究成果已经整理成文发表在本领域有一定影响力的SCI索引源期刊上，并被SCI收录(收录号 IDS Number: 963XN )[2]（相关文章参详见申请人简历及附件二、三）。这些全新研究成果进一步增强了我们开发这一传统中药的信心。
TGF-β1是目前认识的最重要的促肝纤维化因子。抑制TGF-β1对HSC的作用一直以来均是抗肝纤维化重要着眼点[3]。Smad 7是HSC TGF-β信号通路的最主要负反馈调节信号分子，上调Smad 7是抑制TGF-β对HSC不良生物效应的有措施之一[4]。在肝纤维化过程中，TGF-β信号通路还与整合素信号通路存在密切联系。这表现在三个方面：①XXXXXX。②XXXXXX。③XXXXXXXXX。
综上所述，XXXXXXX，如能XXXXXX，可进一步实现XXXXX治疗。
基于以上研究结果，我们研究室在国家自然科学基金资助下，过去三年中应用化学方法合成了RGD和M6P，并将RGD与M6P结合成一新型复合分子RGD-M6P，研究比较了它们对HSC靶向性及在抑制其功能中的作用（项目名称：RGD修饰细胞生物信息调控分子和缀合基因的功能研究，编号：30170412）。我们的研究发现，RGD和RGD-M6P均可抑制HSC活化。RGD在抑制TGF-β激活同时，还可阻止HSC与ECM结合，阻断整合素信号转导。研究还发现，M6P能提高RGD作用于HSC的靶向性，增加其局部浓度，使RGD-M6P显示出较RGD更强的抑制作用[14]。我们首次证实，新型复合分子RGD-M6P用于抗肝纤维化治疗，无论在对HSC靶向的特异性，还是多位点联合作用方面，都优于单一的含RGD序列的肽段或M6P（参见基金结题摘要，相关文章参见申请人简历及附件四）。
RGD-M6P新型复合分子的研制成功及其对HSC靶向与抑制功能的发现，有助于我们去研究更多的HSC靶向选择性高、局部作用强、系统毒性小的新型药物和(或)制剂，从而提高药物的疗效、减轻毒性反应。结合我们对Tet药理作用的分子机制的研究结果，不难发现，XXXXXXXX。基于以上系列研究基础与设想，紧跟国内外在制剂学方面的进展，我们拟设计XXXXXXXXXXX。
当前，受体调节药物靶向（receptor-mediated drug targeting）作为一种新型的给药系统受到人们的重视[16]。XXXXXXXXXXXXXXXXX。
迄今为止，尚未见到XXXXXXXXXXX。
结合国内外同行的研究报道与我们的研究基础，不难推断，XXXXXXXXXXXXXXXXX。
综上所述，我们拟在XXXXXXXXXX。本研究将为XXXXXXXX等提供理论与实践基础。XXXXXXXXXX可以设想，如能取得预期效果，经过良好设计的基础研究后，这一XXXXXX应用于临床的时间不会太久，前景广阔。
参考文献
1 Friedman SL. Mechanisms of disease: Mechanisms of hepatic fibrosis and therapeutic implications. Nat Clin Pract Gastroenterol Hepatol 20xx年国家自然科学基金资助研究成果，在XXXX 化学合成及功能研究、低剂量XXX抗肝纤维化作用和机制的前期工作基础上，提出的多途径、互补协同与靶向治疗肝纤维化的新探索。掌握了国内外在受体调节药物靶向、低毒性高效中药新剂型开发和以HSC的靶标的肝纤维化靶向治疗中的最新研究动态，借鉴“双靶向”干预的最新研究成果，并与自身实践相结合，在理论上、实践上均有可靠基础。
3.3.2 相关实验技术成熟，实验结果可信。本研究使用的实验方法、动物模型和生物分子化学合成等多为国内外应用多年的经典方法，并有自身实践基础。本课题组由掌握以上技术的成员组成，相关技术已应用于科研工作。
3.3.3 人员配备合理，具有扎实的相关工作基础和完善的实验设备及技术支持。申请人长期从事肝纤维化防治研究，先后承担包括国家自然基金在内的各类科研项目15项，指导或协助指导博士后、博士生及硕士生70余名。近四年主持了国家自然科学基金项目“RGD修饰细胞生物信息调控分子和缀合基因的功能研究(编号30170412）”和“人卵泡抑素防治肝纤维化的实验研究(编号30170411)”的研究工作，项目组主要成员参与并完成以上研究工作。实验设计指导者、熟练技术人员及辅助人员等各司其职，可保障研究有条不紊的进行。XXXXXXXXX是国家级重点学科和“211”工程重点建设学科的组成单位之一，长期从事肝纤维化防治研究，先后承担包括国家自然科学基金在内的各级各类科研项目20余项。
4 本项目的特色与创新之处
4.1 本课题首次尝试利用XXXXXXX构建HSC特异性受体调节药物靶向载体。将新型配体人工化学合成、受体调节药物靶向技术与新型脂质体载药技术三者结合应用于肝纤维化防治，有很强的原始创新性。
4.2 本课题首次研究XXXXX生物小分子通过XXXXX与中药粉防己碱相联合，多途径、互补与协同防治肝纤维化。本课题是利用分子机制指导中西药联合应用、构建中药靶向制剂提高疗效降低副作用和多途径协同作用抗肝纤维化的全新尝试，是在总结自身工作基础上进行的大胆设想与创新。
5 年度研究计划及预期研究结果
5.1 年度研究计划：
5.2 预期研究成果
5.2.1 获得快速、有效和大量合成XXXXXXX和高药物包封率、高配体修饰率的稳定XXXXXXXX的技参数，并合成足量研究相关产物。
5.2.2 体外研究证实XXXXXXXX。
5.2.3 在体内XXXXXXXXX，有效降低有效剂量、提高疗效和降低副作用。
5.2.4 研究证实XXXXXXX可成为抗肝纤维化药物新剂型开发的有效载体。
（二）研究基础与工作条件
1 研究基础
1.1既往肝纤维化防治理论和技术。自1981年以来，我们研究室长期从事肝纤维化防治研究，先后对钙拮抗剂、钙调蛋白拮抗剂、大黄素、激活素、肾素-血管紧张素系统及卵泡抑素等在肝纤维化发生发展中的作用进行了系列的研究，积累了较丰富的理论，掌握了相关研究技术。承担了包括国家自然科学基金在内的各类科研项目20多项，先后获省部级以上科技进步奖10项。
1.2粉防己碱抗肝纤维化研究工作积累。项目负责人率先在我国开展钙拮抗剂尤其是中药粉防己碱对肝纤维化防治研究，取得丰富的粉防己碱抗肝纤维化基础和临床研究成果，在国内外期刊发表相关论文50余篇，获省部级以上科技进步奖5项。近两年，我们在上海市教委基金项目“粉防己碱影响肝星状细胞活化信号分子研究（编号02BK14）”资助下完成了小剂量粉防己碱抗肝纤维化效果与机制的研究，在国内外首次报道小剂量粉防己碱可通过影响TGF-β-Smads信号通路抑制HSC活化，相关研究论文被SCI收录(收录号 IDS Number: 963XN)。该研究为指导粉防己碱在肝纤维化防治中应用有重要价值。（参见申请人简历及附件二、三）
1.3生物小分子化学合成及脂质体构建相关工作基础。近四年来，申请人承担并完成了国家自然科学基金项目“RGD修饰细胞生物信息调控分子和缀合基因的功能研究（编号 30170412）”，化学合成了RGD-M6P，分子克隆构建pCI-RGD-Smad7并成功通过脂质体进行基因转染，通过体内外实验观察了RGD-M6P和pCI-RGD-Smad7的生物学效应。细胞及动物学实验均证实pCI-RGD-Smad7和RGD-M6P可减轻ECM沉积，并影响TGF-β1和整合素表达强度和分布。主要研究工作由本项目组成员参与并完成。目前我们正在利用基金很少量结余款项进行合成RGD-M6P修饰SSL的工作。得益于此，他（她）们分别熟练掌握了生物小分子的化学合成相关技术（多肽合成、固相化反应、纳米技术、高效分离技术等）、免疫组织与细胞化学技术、RT-PCR和定量PCR、蛋白印迹、高效液相分析、质谱分析、肝纤维化动物模型及生物信息学方法等与本课题相关的关键技术与方法（相关论文参见申请人简历）。由于以上的工作基础，我们拥有丰富的生物分子合成经验，成熟的生物分子构建技术和良好的人员与设备支持。已经构建成功的RGD-M6P及相关技术要领，可直接用于本课题。构思本课题的重要原因之一是探讨解决简单单一药物治疗中发现的诸多问题而开展的，密切相关的细胞学、动物学实验基础也是本实验成功的重要保证。
2 工作条件
2.1 XXXXXXX设有校属的XXXXXXXXX消化系疾病第三研究室。实验室拥有本项目研究相关的大部分生化、细胞生物学及分子生物学等方面的各种仪器设备，如倒置显微镜摄影设备、γ计数仪、CO2培养箱、酶联免疫测定仪、电转膜仪、低温冰箱、低温超速离心机及其它分子生物学设备等。
2.2 XXXXXXXXXXXX医学研究所为本项目开展提供了仪器、技术支持和信息服务平台。我们可免费使用相关设备如层流无菌室、质谱仪、高效液相色谱仪、定量PCR仪、NICOMP Particle Sizer Model 3700分析系统、流式细胞仪和Flous-S MultiImage图像分析仪等，新华医院和学院均有SPF级的动物饲养条件。